背景和目的:目前由于供肺短缺,许多患者在等待的过程中死亡。通过使用心脏死亡器官捐献(donation after cardiac death,DCD)供肺扩大供体库是解决该问题的有效途径之一。目前可控DCD是临床DCD供体的主要来源,大量不可控DCD供体因热缺血时间过长致肺脏受损而限制了其临床使用。此外,DCD供肺获取后长时冷保存转运,可进一步损害供肺质量。因此,提升不可控DCD供肺的质量有助于缓解肺移植供体器官短缺的现实状况。DCD供肺会经历热/冷缺血-再灌注损伤,热/冷缺血期间细胞氧化应激反应增强、正常生理功能受损,可致细胞死亡。坏死细胞还可释放损伤相关分子模式(damage associated molecular patterns,DAMPs)蛋白引发炎症反应。血流再灌注是挽救细胞缺血损伤的重要一环,但同时,血流再通可引发强烈的氧化应激反应、炎症反应,造成肺组织进一步损害。右美托咪定(Dexmedetomidine,DEX)为高选择性α_2肾上腺素受体(α_2 Adrenoceptor,α_2AR)激动剂,具有抗炎、抗凋亡等细胞保护作用,DEX已被证实对多种器官具有保护作用。氙气(Xenon,Xe)可拮抗N-甲基-D-天冬氨酸(N-Methyl-D-aspartate,NMDA)受体及调控多种细胞信号转导,研究证实Xe可减轻肾移植过程中缺血再灌注损伤以及肾移植后的远端肺损伤。氩气(Argon,Ar)在高压下与γ-氨基丁酸A型(Gamma-aminobutyric acid,GABAA)受体直接作用产生麻醉效应,动物研究证实Ar可发挥移植肾保护作用。因此,本研究拟探讨在威斯康星大学保存液(University of Wisconsin solution,UW液)中添加DEX、Xe、Ar对DCD供肺的保护效果,以期提高临床DCD供肺使用率从而缓解供肺短缺的现况。研究方法:1.配制DEX、Xe、Ar添加的UW液,建立猪DCD供体模型将按一定比例混合的气体:氧气(O_2)、氮气(N_2)、二氧化碳(CO_2)、Xe与Ar充进5个钢瓶。然后将钢瓶内混合气体通过洗气瓶添加于UW液内(UW液内含或不含0.1 nmol/L DEX),共配制成6种器官保存液。小香猪通过静推顺式阿曲库铵(0.5～1mg/kg)及单次注射大剂量丙泊酚(30～40 mg/kg)使其呼吸、循环短时间内停止工作,以此建立心脏死亡供体模型。待热缺血(Warm Ischemia,WI)60 min后取肺并将其切成长宽约1ⅹ2 cm、厚度为0.5 cm以内的薄片。部分切片立即置于多聚甲醛中固定或置于液氮中保存并命名为WI组,剩余切AMG510片置于上述配制的N_2/DEX/Xe/Ar添加的UW液中,随后4℃冷缺血(Cold Ischemia,CI)24 h,并分别命名为WI+CI+N_2组、WI+CI+DEX组、WI+CI+DEX+30%Xe组、WI+CI+DEX+50%Xe组、WI+CI+DEX+30%Ar组、WI+CI+DEX+50%Ar组。2.DEX、Xe添加的UW液对猪DCD供肺的保护作用肺组织切片行HE染色与组织损伤评分,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot法检测Cleaved Caspase3、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)表达,免疫组化检测GPX4、高迁移率族蛋白1(High Mobility Group Protein 1,HMGB1)表达。3.DEX、Ar添加的UW液对猪DCD供肺的保护作用肺组织切片行HE染色与组织损伤评分,采用TUNEL染色法检测肺组织细胞凋亡变化。研究结果:1.建立4头猪心脏死亡供体模型2.DEX、Xe添加的UW液对猪DCD供肺的保护作用与WI组相比:HE染色结果显示,冷缺血24 h后肺泡结构未见明显破坏,肺部炎症细胞浸润不明显,肺损伤评分无显著变化(P>0.05);WI+CI+N_2组TUNEL阳性细胞数、CleGefitinib-based PROTAC 3体内实验剂量aved Caspase3表达显著增加(P<0.05);肺组织GPX4蛋白表达无显著变化(P>0.05);WI+CI+N_2组HMGB1表达量显著增多(P<0.05)。与WI+CI+N_2组相比:multiple sclerosis and neuroimmunologyWI+CI+DEX组、WI+CI+DEX+30%Xe组和WI+CI+DEX+50%Xe组的TUNEL阳性细胞数显著减少(P分别为<0.001,<0.05,<0.05);WI+CI+DEX+30%Xe组HMGB1表达显著降低(P<0.01)。3.DEX、Ar添加的UW液对猪DCD供肺的保护作用与WI组相比:HE染色结果显示冷保存24 h后肺损伤评分亦无显著差异(P>0.05);WI+CI+N_2组的TUNEL阳性细胞数显著增加(P<0.05)。与WI+CI+N_2组相比:WI+CI+DEX组(P<0.05)、WI+CI+DEX+30%Ar组(P<0.05)的TUNEL阳性细胞数显著减少。研究结论:1.静注肌松药联合单次大剂量注射丙泊酚建立猪DCD供体模型的方法操作简单、重复性好,是模拟临床DCD供者的良好模型。2.DEX、DEX+30%Xe、DEX+50%Xe添加的UW液可抑制细胞凋亡对猪DCD供肺发挥细胞保护作用。DEX+30%Xe添加的UW液可抑制HMGB1蛋白表达对猪DCD供肺发挥细胞保护作用。3.DEX或DEX+30%Ar添加的UW液可通过抑制细胞凋亡对猪DCD供肺发挥细胞保护作用。