目的 建立并验证用于抗体药物中组氨酸含量测定的反相高效液相色谱法(reverse-phase high performance liquid chromatography, RP-HPLC)。方法 利用柱前衍生法建立组氨酸含量检测方法，并对该方法的专属https://www.selleck.cn/products/Puromycin-2HCl.html性、准确度、重复性、中间精密度、线性、工作范围和耐用性进行验证。结果 该方法专属性良好，在组氨酸的保留时间范围内，无基质缓冲液组分和分析溶剂的干扰，且供试品和对照品的组氨酸保留时间偏差为0.45%,符合可接受标准(≤5%)。5个水平的加标溶液(70%,85%,100%,115%和130%)的回Biodiverse farmlands收率在93.0%～102.4%之间，且3次独立测定各水平浓度的变异系数均小于5%,符合准确度、线性和检测范围的验证要求(回收率在95%～105%之间，变异系数≤5%)。组氨酸浓度在2.170～4.033 mg/ml(相当于每次进样10.85～20.15μg)范围内，进样量与峰面积呈良好的线性关系(R~2=0.995),且y轴截距的95%置信区间包含原点。同一份供试品溶液的6次独立测定浓度的变异系数为1.2%,符合重复性的可接受标准(≤5%);两名实验人员分别在3个工作日对同一份供试品溶液的18次独立测定的浓度的变异系数为3.1%,符合中间精密度的可接受标准(≤10%)。衍生后的待测品和对照品溶液分别在(5±3)℃密封瓶条件下在自动进样器中暂存24 h和26 h后的回收率分别为100.3%和100.2%,符合耐用性的可接受标准(9Gefitinib-based PROTAC 3分子式5%～105%)。结论 建立了柱前衍生RP-HPLC检测抗体药物中组氨酸含量的方法，该方法重现性好、专属性强、精密度及准确度高，可对其组氨酸进行质量控制。