从JAK1/2-STAT1信号通路探讨A型流感病毒对巨噬细胞的影响及麻杏石甘汤含药血清的干预作用

基于Janus激酶/信号转导和转录激活因子(Janus kinase /signal transducer and activator of Bucladesine抑制剂transcription,JAK/STAT)通路介导的细胞因子表达研究A型流感病毒(IAV)对巨噬细胞的影响,并进一步探讨麻杏石甘汤含药血清的干预作用。RAW264.7分为正常对照组、JAK/STAT信号通路激活剂组、JAK/STAT信号通路抑制剂组、模型对照组、奥司他韦组、抗病毒颗粒组、麻杏石甘汤组。经IAV干预后,换为相应的培养基,继续培养24、48h后收集样本,检测与分析指标:以ELISA法检测细胞培养上清液中IL-1β(interleukin-1β,IL-1β)、CXCL2(CXC chemokine ligand 2,CXCL2)的分泌水平;以RT-qPCR法检测细胞中流感病毒核蛋白(Nuclear Protein,NP)、JAK1/2、STAT1的mRNA表达水平;以Western blotting法检测细胞中JAK1/2、STAT1的蛋白表达水平;以免疫荧光法检测细胞中磷酸化STAT1(phosphorylated SBIBW2992TAT1,p-STAT1);Pearson相关分析分别评估p-STAT1蛋白表达水平与IL-1β、CXCL2分泌水平之间的相关性。结果显示,细胞培MLT Medicinal Leech Therapy养上清液中IL-1β、CXCL2分泌水平、流感病毒NP及细胞JAK1/2、STAT1 mRNA表达水平、细胞JAK1/2、STAT1、p-STAT1 蛋白表达水平均升高(P<0.05或0.01);细胞p-STAT1与IL-1β、CXCL2分泌水平呈现正相关。麻杏石甘汤能下调细胞培养上清液中IL-1β、CXCL2分泌水平、下调流感病毒NP及细胞JAK1/2、STAT1 mRNA表达水平、下调细胞中JAK1/2、STAT1、p-STAT1蛋白表达水平(P<0.05或0.01)。JAK1/2-STAT1信号通路激活及其介导的炎症因子失衡可能是IAV所致巨噬细胞免疫病理损伤的分子机制之一,麻杏石甘汤可能通过调控该信号通路缓解IAV的致病作用。