目的:肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemia-reperfusion injury,HIRI)是指在肝脏外科中特别是在肝切除和肝移植临床手术过程中,需要暂时阻断进入肝脏的血流,而后恢复肝脏血流却引起肝脏损伤进一步加重的现象。HIRI的发生,涉及炎症、氧化应激、细胞代谢紊乱、细胞死亡等多种复杂机制,是引起早期肝移植失败和器官排斥反应的重要因素,严重影响患者的肝脏手术预后。目前临床上尚缺乏防治HIRI确切有效的药物。来源于传统中药材大血藤重要药理活性成分的丁香脂素(syringaresinol,Syr),是一种天Nirmatrelvir然的中药单体,具有多种药理作用,尤其在抗炎和抗氧化等方面,但丁香脂素在肝脏缺血再灌注损伤中的作用尚未见有报道。甘草酸二铵(diammonium glycyrrhizinate,Dg)作为甘草主要提取物,也具有抗炎作用,且已广泛运用于临床伴有谷丙氨基转移酶升高的急、慢性肝炎的治疗。本论文通过与甘草酸二铵作对比研究丁香脂素对肝脏缺血再灌注损伤的作用,旨在为临床防治肝脏缺血再灌注损伤的药物开发提供实验室依据。方法:8周龄C57BL/6雄性小鼠,间断夹闭全部入肝血流,建立肝脏间断缺血再灌注损伤(Intermittent hepatic ischemia-reperfusion injury,IHIRI)模型;持续夹闭入肝全部血MDV3100纯度流建立全肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)模型;单纯行开immune system关腹手术操作为假手术(Sham)对照组。手术前1 h灌胃给予丁香脂素、甘草酸二铵。IHIRI组经血管夹完全阻断入肝血流10 min后恢复供血2 min,重复上述缺血-再灌注过程2次后恢复肝脏血流灌注6 h,分别收集小鼠血液、肝脏;HIRI组完全夹闭入肝血流30 min后恢复肝脏血流灌注6 h,分别收集小鼠血液、肝脏。检测小鼠血清转氨酶(ALT、AST)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,评估丁香脂素对HIRI过程中肝细胞损伤的作用。检测血清白介素(IL-1β、IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平以及肝组织中性粒细胞、巨噬细胞浸润情况评估丁香脂素在抗炎方面对HIRI的作用。肝脏组织病理染色、细胞凋亡检测,评估丁香脂素对HIRI过程中组织结构损伤及细胞死亡的作用。检测小鼠肝组织中MDA水平,评估丁香脂素对HIRI过程氧化应激的作用。检测脂质代谢的重要信号通路(神经鞘脂通路)中关键酶SPHK1、SPHK2的表达情况,探究丁香脂素对HIRI作用的机制。结果:与手术组(HIRI)相比,HIRI手术前给予丁香脂素或甘草酸二铵,都可显著降低小鼠血清中转氨酶(ALT、AST)及乳酸脱氢酶(LDH)等肝细胞损伤指标,血清白介素(IL-1β、IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF-α)等炎性细胞因子水平也显著降低,同时中性粒细胞及巨噬细胞等炎性细胞浸润明显被抑制,氧化应激减轻,肝组织坏死、结构损伤程度减缓,肝细胞凋亡数量明显降低,神经鞘脂通路中关键酶SPHK1表达水平升高。相比甘草酸二铵,丁香脂素对HIRI中的肝细胞损伤、肝脏组织结构损伤、肝细胞凋亡、炎性细胞浸润、炎性细胞因子以及氧化应激产生的抑制作用更显著;肝脏间断缺血再灌注损伤(IHIRI)手术前给予丁香脂素干预后,结果显示,对肝细胞损伤、肝脏组织结构损伤、肝细胞凋亡以及炎性细胞浸润和炎性细胞因子产生的改善效果更明显,神经鞘脂通路中关键酶SPHK1表达水平显著升高,提示在肝脏切除和肝移植临床手术过程中采用间断缺血再灌注损伤手段,同时结合药物干预,可能是改善HIRI的一种比较优化的方案。结论:丁香脂素可以通过改善肝细胞及肝脏组织结构损伤、减轻炎症反应、减少肝细胞凋亡、减轻氧化应激等作用起到保护肝脏缺血再灌注损伤的作用,而间断缺血结合丁香脂素干预的方法可进一步减轻HIRI。上述丁香脂素对HIRI的作用,其机制可能与神经鞘脂通路中关键酶SPHK1表达上调有关。