目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(ultra performance liquid chromatography tandem quadrupole time of flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)对藏药宽筋藤Tinospora sinensis藤茎中生物碱类成分进行分析和鉴定。方法 采用色谱柱Waters ACQUITY UPLC C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 CP-690550供应商mm,1.7μm),以流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液进行梯度洗脱。使用电喷雾离子源(ESI),正离子模式下采集数据;selleck抑制剂通过测定宽筋藤生物碱对脂多糖诱导小鼠巨噬RAW264.7细胞释放一氧化氮的抑制能力,评价其抗炎活性。结果 通过二级高分辨质谱分析结合对照品数据及相关文献,共鉴定出73个生物碱,包括12个原小檗碱型生物碱、23个四氢原小檗碱型生物碱、20个苄基异喹啉类生物碱、9个阿朴啡类生物碱、9个其他类生物碱。抗炎活性检测表明,宽筋藤生物碱对脂多糖刺激的RAW264.7细胞的一氧化氮具有较强的抑制作用。结Clinical biomarker论对藏药宽筋藤生物碱类成分进行较为全面系统地解析,为药效物质基础研究及开发应用奠定基础。
不同量表在筛查重症肌无力患者睡眠呼吸障碍中的效果评价
目的 本文旨在对比不同量表在筛查临床稳定期重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者睡眠呼吸障碍(sleep-disordered breathing,SDB)的效能,以期找出最优的筛查方案。方法 本研究共顺序纳入2017年10月至2019年1月就诊于唐都医www.selleck.cn/products/forskolin院神经内科的30例临床稳定期MG患者。使用爱泼沃斯嗜睡量表(Epworth sleepiness scale,ESS)评估嗜睡程度,Stop-Bang量表、柏林量表(Berlin questionnaire,BQ)、sleep-disordered breathing in neuromuscular disease questionnaire-5(SiNQ-5)、NoSAS量表评估睡眠呼吸障碍患病风险。采用单独诊断及联合诊断的方式,分析5种量表筛查MG患者SDB的效能。采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,R OC)分析不同量表预测MG患者SDB的区分度。采用Spearman相关性分析比较各量表筛查结果间的相关性。以双侧检验P<0.05为差异有统计学意义。结果 REI≥10时,调整NoSAS量表(NoSAS-revised)的曲线下面积(areaunder the curve,AUC)最大,Stop-Bang量表和NoSAS量表AUC略低,三者差异均有统计学意义。NoSAS-revised的灵敏度和阴性预测值最高,Stop-Bang量表和NoSAS量表的特异度和阳性预测值最高。BQ和Si NQ-5的灵敏度最低,Si NQ-5的特异度、阳性预测值、阴性预测值最低。REI≥5时,BQ诊断价值最优,Si NQ-5最差。REI≥10时,NoSAS诊断价值最优,ESS最差。REI≥15及更高界值时,Stop-Bang量表诊断价值最优,ESS最差。Stop-Bang+NoSAS的Se最高(平行试验71.0%,系列试验21.3%),Sp最高(平行试验88.6%,系列试验99.7%)。Si NQ-5与其他量表联合诊断的诊断价值均较低。结Translational biomarker论 NoSAS+Si NQ-5的联合诊断策略,既可以筛查患者是否存在Fer-1纯度膈肌无力或OSA,又兼顾了联合灵敏度与联合特异度,是较为可行的联合诊断策略。
儿童幽门螺杆菌感染临床特征分析
目的分析宁夏医科大学总医院近十年住院儿童幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的临床资料,探讨该病的临床特点、治疗效果及危险因素,为降低感染率、有效预防和治疗儿童Hp感染提供参考依据。方法选取2013年1月至2022年12月在宁夏医科大学总医院完善进行Hp相关检测的528例住院患儿为研究对象,以明确是否为Hp感染,根据Hp诊断标准分为感染组和非感染组,将两组患儿的一般资料、临床表现、胃镜下表现等进行组间比较,将差异有统计学意义的指标进行分层赋值,noninvasive programmed stimulation纳入多因素logistic回归进行危险因素分析。感染组患儿均行Hp根除治疗,根据停药1月后复查13C-尿素呼气试验结果分为有效组和无效组,对比不同治疗方BLZ945试剂法根除率,为宁夏医科大学总医院Hp感染患儿预防及治疗对策提供依据。结果1.一般资料:本研究中感染组患儿占比41.9%(221/528)。13-14岁儿童感染率最高,占比44.9%,各年龄段比较差异无统计学意义(χ~2=3.011,P=0.222)。男性患儿(χ~2=6.622,P=0.010)、来源地为农村(χ~2=4.856,P=0.028)、存在胃病家族史(χ~2=5.919,P=0.015)、家庭常居人数>3人(χ~2=5.6PF-02341066浓度99,P=0.017)、饭前不洗手(χ~2=11.537,P=0.001)的儿童Hp感染率明显升高,差异有统计学意义(P≤0.05)。2.多因素分析:多因素logistic回归分析显示,患有胃病家族史(OR=4.961,95%CI:1.037-23.729,P=0.045)是儿童Hp感染的危险因素,饭前洗手(OR=0.128,95%CI:0.028-0.589,P=0.008)是儿童Hp感染的保护因素。3.临床表现:以腹痛为主要症状的患儿Hp感染率为59.0%,恶心和(或)呕吐为主要症状的患儿Hp感染率为30.5%。以腹痛为主要症状的患儿Hp感染率明显升高,差异有统计学差异(χ~2=5.186,P=0.063),其他不同症状之间Hp感染率比较无明显差异(P>0.05)。4.实验室检查:Hp感染患儿共221例。胃镜下表现为消化性溃疡其Hp检出率最高(72.5%),明显高于胃镜下非消化性溃疡其他表现,差异具有统计学意义(χ~2=4.185,P=0.041)。5.治疗与转归:本研究中Hp有效根除率占比79.4%,其中三联疗法根除率为78.0%,四联疗法根除率为85.0%。结论1.近年来儿童Hp感染率总体呈上升趋势,男童发病率高于女童,农村地区发病率高于城镇地区。2.儿童Hp感染症状以腹痛为主,Hp感染与腹痛两者之间存在密切相关性。3.饭前洗手是儿童Hp感染的保护因素,有胃病家族史是儿童Hp感染的危险因素。4.在根除Hp感染治疗中,四联疗法根除率高,与此同时向家属进行科学宣教,督促患儿按期规律服药,提高服药依从性对于根除Hp也尤为重要。
滨蒿提取物对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的保护作用及抗氧化活性
目的:研究滨蒿提取物(Artemisia scoparia extract)减轻脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用,并评价其体外抗氧化活性。方法:将60只ICR小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、醋酸地塞米松2.5 mg/kg组和滨蒿提取物100、200、400 mg/kg组,小鼠连续给药 5 d,Dorsomorphin体内末次给药后1.5 h鼻腔滴入10 mg/kg LPS建立小鼠Rapamycin核磁急性肺损伤模型。造模后16 h,检测小鼠肺指数,试剂盒检测血清中髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平;采用苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理学变化。运用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、2,2'-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基和超氧阴离子自由基清除试验及铁离子还原能力测定试验,对滨蒿提取物进行体外抗氧化活性评价。结果:与正常对照组比较,模型对照组小鼠体质量和血清SOD活力明显降低(P<0.05),肺指数和血清MPO、MDA、GSH含量明显升高(P<0.05或P<0.01),肺组织出现明显的病理改变,包括肺泡壁增厚、肺泡出血、炎性细胞浸润;与模型对照组比较,滨蒿提取物200、400 mg/kg组能显著降低小鼠血清MPO和GSH含量(P<0.05);滨蒿提cutaneous autoimmunity取物400 mg/kg组显著降低小鼠肺指数和血清MDA含量(P<0.05),显著升高血清SOD活力(P<0.05),同时还能够减轻急性肺损伤小鼠肺组织病理损伤。在滨蒿的体外抗氧化试验中,测得其对DPPH自由基、ABTS自由基和超氧阴离子自由基的IC_(50)分别为 24.46、17.70、347.3 μg/mL。说明滨蒿提取物在体外具有显著的清除自由基的能力,其清除作用与滨蒿提取物的浓度在一定范围内呈现一定的剂量关系。此外,滨蒿提取物对铁离子具有一定的还原能力。结论:滨蒿提取物具有体外抗氧化活性,同时对急性肺损伤小鼠具有明显的保护作用,其作用机制与其具有较好的抗氧化作用有关。
健脾活血方联合针刺法治疗胃络瘀血型慢性萎缩性胃炎的临床疗效及对炎症指标和胃黏膜功能的影响
目的:探讨健脾活血方联合针刺法方案在胃络瘀血型慢性萎缩性胃炎(CAG)患者中的应用效果。方法:选取武汉市第一医院2021年11月至2023年3月收治CAG患者86例,按随机数字表法均分为两组(每组43例),对照组给予常规西药治疗,观察组在其基础上加用健脾活血方联合针刺法方案治疗,观察两组治疗后临床疗效、中医证候积分、病理组织评分、幽门螺杆菌(Hp)转阴率、炎症指标[中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、白细胞介素(IL)-1β]、胃蛋白酶(PG)Ⅰ、PGⅠ/PGⅡ、胃泌素-17(G-17)水平变化及治疗期间药物安全性情况。结果:研究结果显示,治疗后观察组患者总有效率为95.35%(41/43),对照组患者总有效率为79.07%(34/43),观察组患者临床疗效明显高于对照组,差异具有统计学意义(χ2=5.108,P<0.05)。与本组治疗前比较,观察组与对照组患者中医证候主次证积分及总分均明显降低(P<0.05);治疗后与对照组比较,观察组患者中医证候主次证积分及总分降低更明显(P<0.05)。与本组治疗前比较,观察组与对照组患者胃黏膜萎缩、活动性、慢性炎症、肠化生及异型增生病理评分均明显降低(P<0.05);治疗后与对照组比较,观察组患者胃黏膜萎缩、活动性、慢性炎症、肠化生及异型增生病理评分降低更明显(P<0.05)。治疗后与对照组比较,观察组患者Hp转阴MC3化学结构率明显提高(χ2=3.957,P=0.047)。与本组治疗前比较,观察组与对照组患者炎症指标NLR、IL-1β水平biological targets均明显较低(P<0.05);治疗后与对照组比较,观察组患者炎Y-27632体内症指标NLR、IL-1β水平均明显较低(P<0.05)。与本组治疗前比较,观察组与对照组患者PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ水平则明显较高(P<0.05);治疗后与对照组比较,观察组患者PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ水平则明显较高(P<0.05)。与本组治疗前比较,观察组与对照组患者不同时间点的G-17水平差异有统计学意义(P<0.05),治疗后与对照组相比,观察组不同时间点G-17水平均较高(P<0.05),且与对照组相比,观察组G-17水平升高趋势差异有统计学意义(P<0.05)。两组药物不良反应发生风险差异无统计学意义。结论:健脾活血方联合针刺法方案用于CAG患者可有效缓解患者症状,提高Hp转阴率,抑制机体炎症,调节PG、G-17水平,从而控制甚至逆转胃黏膜萎缩,降低其向胃癌进展的概率。
补肾通络解毒法治疗糖尿病肾病Ⅲ-Ⅳ期的疗效回顾及核心方网络药理学研究
目的:分析补肾selleck HPLC通络解毒法“核心方”治疗糖尿病肾病Ⅲ-Ⅳ期(肾虚瘀毒证)的有效性和安全性,并筛选“核心方”治疗糖尿病肾病Ⅲ-Ⅳ期的有效成分和靶点,探讨“核心方”治疗DKD的可能作用机制,为本方治疗DKD提供科学依据。方法:第一部分:于2020年01月01日至2021年12月31日长春中医药大学附属医院肾病科门诊和疗区运用补肾通络解毒法“核心方”治疗的糖尿病肾病Ⅲ-Ⅳ期的患者,严格按照纳排标准进行筛选,并收集患者的基础资料和中医四诊资料;分别以治疗前、1个疗程、2个疗程、Phospholipase (e.g. 抑制剂4个疗程为观察节点(15天为1个疗程),观察疗效指标包括ALBU、24h UTP、FBG、BUN、Scr,并运用SPSS23.0软件包对数据进行处理分析。第二部分:从TCMSP和Herb数据库筛选出补肾通络解毒法“核心方”的有效活性成分和靶点;从Gene Cards数据库收集DKD相关靶点;通过Cytoscape3.7.2软件作药物-有效成分-靶点网络图;运用Venny2.1对“核心方”预测靶点与DKD相关靶点进行交集并绘制韦恩图;通过Cytoscape3.9.1软件制作PPI网络图和拓扑分析;通过DAVID平台进行KEGG富集分析和Go富集分析。结果:第一部分:收集DKD患者男性61例,女性39例,共100例,平均年龄为56.6岁;Ⅲ期患者DM病程主要集中在6-10年,而Ⅳ期患者以10-15年居多;合并其他疾病中高血压疾病发生率为71%;实验室指标中的ALBU、24h UTP、BUN、FBG与治疗前相比均有降低,差异具有统计学意义(p<0.05);Scr与治疗前相比变化不大,差异不具有统计学意义(p>0.05);Ⅲ期患者治疗总有效率为82.3%;Ⅳ期患者治疗总有效率为73.5%;中医症候积分较治疗前减少,差异具有统计学意义(p<0.05)。第二部分:在TCMSP和Herb数据库中得到补肾通络解毒法“核心方”10味中药的113个活性成分,5515个相关靶点,在Gene Cards和OMIM数据库中共得到3286个DKD相关靶点,绘制韦恩图共得到449个交集靶点;在Cytoscape构建化合物-靶点-疾病网络图,共有563个节点和3892条连线,主要成分为甘草素、泽泻醇B、谷甾醇、刺槐黄素、木犀草素等;PPI网络分析得到核心成分,主要是AKT1、GAPDH、TNF等;GO功能富集共获取1plant-food bioactive compounds751个条目,主要涉及蛋白质磷酸化、质膜、蛋白质结合等;KEGG功能富集共193个通路,主要涉及癌症信号通路、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路等。结论:补肾通络解毒法“核心方”能够改善糖尿病肾病Ⅲ-Ⅳ期的患者的临床症状和实验室指标,具有良好的疗效和安全性,并通过干预癌症信号通路、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路等,发挥降血糖、降低尿蛋白排泄水平的作用,延缓其向终末期肾病进展。
基于网络药理学探讨畲药十二时辰镇痛作用机制
目的 通过网络药理学方法探究畲药“十二时辰”镇痛作用的有效成分及可能的作用机制。方法 利用TCMSP数据库对十二时辰已知化学成分进行活性筛选并收集对应的相关靶点,利用GeneCards数据库和DisGeNET数据库收集疼痛相关靶点,利用Venny网站筛选出二者的交集基因,作为十二时辰镇痛作用的潜在靶点;利用Cytoscape软件构建活性成分-靶点网络、利用STRING数据库构建PPI网络、利用David 6.Global ocean microbiome8数据库对十二时辰潜在靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,利用Cytoscape软件构建十二时辰selleckchem AZD1152-HQPA成分-靶点-信号通路网络。结果 网络分析确PF-03084014定十二时辰中11个化合物与24个靶点基因与镇痛作用有关,蛋白互作网络的核心基因是ACTB、NOS3、CASP3、PTGS2、RELA和PPARA,通过KEGG确定核心通路主要包括非酒精性脂肪肝、心肌细胞的肾上腺素能信号传导、流体剪切应力与动脉粥样硬化等。结论 十二时辰可能通过多靶点、多信号途径的相互作用对炎症、癌症引起的疼痛及神经性疼痛起到镇痛作用。可为下一步实验研究提供依据。
针刺联合康复训练治疗前交叉韧带重建术后股四头肌萎缩的疗效观察
目的 观察针刺联合康复PCI-32765训练治疗前交叉韧带(anterior cruciate ligament, ACL)重建术后股四头肌萎缩的临床疗效。方法 将92例ACL重建术后股四头肌萎缩的患者随机分为治疗组和对照组,每组46例。对照组采用康复训练,治疗组在康复训练基础上联合针刺治疗。观察两组治疗后视觉模拟量表(visual analog scale, VAS)评分、Lysholm评分、膝关节活动度、大腿周径萎缩指数、股四头肌厚度及伸膝肌力的变化,并比较两组临床疗效及治疗安全性。结果 治疗组总有效率为93.5%,对照组为76.1%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后LDorsomorphin IC50ysholm评分、VAS评分、膝关节活动度、大腿周径萎缩指数、股四头肌厚度、伸膝肌力分级与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后上述指标与对照组比较,immune cytolytic activity差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗期间均未出现与治疗有关的不良事件。结论 针刺联合康复训练能够有效改善ACL重建术后股四头肌萎缩,提高股四头肌厚度和肌力,增强患者膝关节功能。
m~6A修饰及(去)甲基化酶与CKD的关系和患病影响因素的研究
目的:1.通过Me RIP-Seq分析揭示m~6A甲基化在CKD中的修饰情况,初步筛选m~6A修饰相关m RNAs和相关信号通路;2.探讨m~6A相关修饰酶在CKD的表达水平和肾纤维化因子之间的关系;3.筛选老年人群中CKD的影响因素;方法:1.选取华北某市两社区内进行体检的老年人群,按CKD的诊断标准分为病例组和对照组。通过面对面调查的方式,结合健康问卷对研究对象的基本情况、健康状况和生物样品进行收集。2.采用高通量测序技术Me RIP-Seq对病例组和对照组进行转录组测序。在符合质量控制和完整性的前提下,利用m~6A抗体通过免疫共沉淀实验建立测序文库,寻找m~6A的Motif序列。将筛选出的差异基因进行KEGG富集分析和GO分确认细节析,选出m~6A水平与m RNA表达水平同时变化的基因。利用GSEA富集分析的方法判断CKD中相关信号通路的状态。3.应用对硝基苯酚法测定尿中β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(UNAG)的含量;苦味酸比色法测定尿肌酐(UCr)水平;全自动生化分析仪测定研究CB-839纯度对象的血肌酐(SCr)、血糖(Glu)和血脂水平;相对定量PCR法检测人外周血中甲基转移酶METTL3和METTL14,去甲基转移酶ALKBH5和FTO的相对表达水平;Elisa法检测血浆中纤维化因子(TGF-β1)的含量。4.采用Epidata3.0录入数据,采用SPSS 23.0进行数据分析。组间比较采用t检验,对于不符合t检验条件的采用Wilcoxon法进行检验;计数资料采用χ~2检验,相关性检验采用Spearman相关分析。运行R3.6.1进行LASSO回归,使用五折交叉验证选择最佳λ值并作为检验LASSO回归的方法。采用随机森林和Gini指数将变量重要性评分排序,选取CKD中较重要的影响因素。检验水准α=0.05。结果:1.按照纳入排除标准筛选出病例组和对照组各12人进行高通量测序。结果显示,病例组中m~6A的总水平高于对照组,且在CKD病例中发现了甲基化经典Motif序列,筛选出了m~6A修饰水平有显著差异且m RNA显著变化的基因13个,其中包含高甲基化且m RNA水平升高的基因1个,高甲基化而m RNA水平下降的基因3个,低甲基化而m RNA水平升高的基因9个。GO分析结果显示,差异基因在转录调节、信号转导、蛋白结合、RNA结合、金属离子结合等注释类别中显著富集。KEGG分析显示差异基因与癌症通路、RAS信号通路、Wnt信号通路、脂代谢等过程有关。2.单因素分析共纳入研究对象773人,其中对照组656人,病例组117人。结果显示对照组和病例组的年龄、性别、人均月收入、教育程度、BMI、饮酒、吸烟和高密度脂蛋白之间的差异有统计学意义(P<0.05)。对照组UNAG的中位数水平为11.89U/g Cr,病例组UNAG的中位数水平为15.41 U/g Cr;对照组BUN的中位数水平为5.23mmol/L,病例组BUN的中位数水平为5.89 mmol/L,病例组与对照组的UNAG、BUN差异有统计学意义(P<0.05)。病例组和对照组的纤维化因子TGF-β1和UCr水平差异暂未发现统计学意义。3.病例组和对照组之间的m~6A去甲基化酶ALKBH5相对表达水平有统计学差异(P<0.05),病例组中ALKBH5的相对表达水平更低。甲基转移酶METTL3和METTL14以及去甲基化酶FTO在两组之间的差异没有统计学意义。4.相关性分析结果显示,UNAG和TGF-β1有负相关性(r=-0.08,P<0.05);UNAG和FTO有负相关性(r=-0.14,P<0.001);UNAG和UCr正相关性(r=0.22,P<0.001);UCr和TGF-β1有负相关性(r=-0.08,P<0.05);METTL14和TGF-β1有负相关性(r=-0.10,P<0.05)。5.将研究因素纳入LASSO回归,结果显示CKD可能与FTO、ALKBH5、性别、年龄、BUN、BMI、TGF-β1、UNAG、LDL、TG、UCr、高血压患病情况、人均月收入和HDL有关。采用随机森林和Gini指数将上述变量进行重要排序,结果显示重要性最高的7个变量分别是BMI、ALKBH5、UCr、UNAG、BUN、TGF-β1和FTO,应用ROC曲线对模型进行判别,曲线下面积(AUC)为0.lipid mediator788,说明模型总体较好。结论:1.在CKD病例组中发现了经典的甲基化结合位点Motif序列,且CKD中m~6A总水平升高,提示CKD的发生和发展可能受m~6A调控。2.m~6A可能通过调控肾纤维化引起肾损伤。3.BMI、ALKBH5、UCr、UNAG、BUN、TGF-β1和FTO是老年人群CKD的重要影响因素。
驴乳及其酪蛋白糖巨肽的抗炎特性研究
驴乳营养价值高,含有丰富的不饱和脂肪酸、乳清蛋白和乳糖,化学成分与人乳接近,能够为人体提供足够的营养,能促进肠道益生菌的生长,参与新陈代谢,具有抗菌、抗病毒、免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、低过敏性等多种生物活性,是一种十分值得开发的宝贵资源。本研究主要以驴全乳为研究对象,对其抗炎特性进行研究,并对驴乳中酪蛋白糖巨肽的分离条件进行优化,最后对驴乳酪蛋白糖巨肽的抗炎特性进行研究,主要研究结果如下:1.测定在脂多糖诱导作用下细胞产生炎症,并测定炎症前后细胞的细胞活力表明,当LPS作用量为10μg/m L时细胞存活率(67.22%)相比对照组显著降低(P<0.05),地塞米松作为阳性对照,作用量为50μg/m L时细胞存活率达80.32%,相对于脂多糖组细胞活力显著增加(P<0.05);经过细胞毒性试验说明驴全乳本身未对巨噬细胞RAW264.7产生毒性。细胞由圆润状态出现伪足且体积变大,同时脂多糖组NO释放量较对照组显著增加(P<0.01)到5.81±0.28μmol/L,经地塞米松预保护后,相对于脂多糖组NO释放量显著降低(P<0.01)到1.75±0.14μmol/L,表明炎症模型构建成功。2.检测炎症相关因子含量变化发现,在经脂多糖诱导RAW264.7细胞产生炎症后,TNF-α含量达645.89 pg/m L,相较对照组541.96 pg/m L显著增加(P<0.01),IL-6含量为123.33 pg/m L,相较对照组78.22pg/m L也显著增加(P<0.01),经驴乳和牛乳治疗后,两者含量都随着乳作用浓度的增加而减少;脂多糖组IL-10含量相对于对照组的468.91 pg/m L显著减少(P<0.01)到361.25pg/m L,经驴乳和牛乳治疗后其含量显著增加(P<0.01);经脂多糖诱导后炎症细胞NO释放量相对于对照组1.09μmol/L显著增加(P<0.01)到5.81μmol/L,地塞米松组相对于脂多糖组显著降低(P<0.01)至1.74μmol/L,经驴乳和牛乳治疗后也显著降低(P<0.01),在同等剂量作用下,驴乳组要比牛乳组NO释放量降低程度更大。相关炎症指标测定结果都表现出驴乳的抗炎效果要优于牛乳,表明驴乳对炎症细胞有更加明显的保护作用。3.测定驴乳作用前后炎症细胞的凋亡率结果显示,空白对照组细胞凋亡率为3.20%,脂多糖组为13.00%,地塞米松组3.80%,当驴乳作用浓度分别为200、400、800μg/m L时,细胞凋亡率分别为4.60%、5.10%、5.90%,同样浓度的牛乳作用下凋亡率为6.20%、7.40%、8.50%,可以看出细胞凋亡率随着驴乳和牛乳作用浓度的升高而增加,而且驴乳治疗后整体比例要低于牛乳组,说明在相同作用浓度下,驴乳对细胞炎症的治疗作用要比牛乳好。4.通过以上研究发现驴乳是具有抗炎特性的,随即对驴乳中酪蛋白糖巨肽进行分离,采用响应面法multimedia learning优化驴乳酪蛋白糖巨肽的分离条件,最佳条件参数为:酶液添加量0.29%,酶解时间4.14 h,离心时间9.49 min,对应糖巨肽纯度可高达47.21%。并测定炎症因子TNF-α和IL-6含量相对于脂多糖组显著降低(P<0.01),而且两者含量都随着糖巨肽作用浓度的增加而减少。经糖巨肽治疗后IL-10IDN-6556生产商含量显著增加(P<0.01),细胞凋亡率随着糖巨肽作用浓度的升高而降低,说明在糖巨肽对细胞炎症具有一定的治疗作用,且高浓度糖巨肽抗炎要比低浓度好。本文利用体外构建巨噬细胞RAW264.7炎症模型,对驴全乳的抗炎特VP-16溶解度性进行研究,将驴乳中的酪蛋白糖巨肽的分离条件进行优化,研究发现驴乳及驴乳中酪蛋白糖巨肽具有抗炎作用,这为研究驴乳及其成分的抗炎机制提供理论依据,作为开发富含驴乳酪蛋白糖巨肽产品的基础,为驴乳制品的研究提供新思路。